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蛋白质“扩增测序”新方法

Peer-Reviewed Publication

Science China Press

AmproCode技术示意图

image: AmproCode技术借助氨基酸侧链特异的偶联反应,将DNA“条码”标记到蛋白质的目标氨基酸上,结合qPCR定量放大DNA信号,实现蛋白质中特定氨基酸的“编码”与“扩增”。借助为之“量身定做“的蛋白质解析计算机程序,分析实验获得的氨基酸比例信号,即可完成对数据库中蛋白质的指认。 view more 

Credit: ©《中国科学》杂志社

近日,《国家科学评论》在线发表了北京大学化学与分子工程学院、北大-清华生命联合中心陈鹏课题组与王初课题组合作的研究成果。该工作开发了一种全新的蛋白质“扩增测序”的方法(AmproCode)。

研究者借助氨基酸侧链特异的偶联反应,设计了半胱氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、天冬氨酸/谷氨酸和酪氨酸特异的DNA偶联策略,将DNA“条码”成功标记到目标氨基酸的侧链上。qPCR能定量放大DNA“条码”的信号,实现蛋白质中特定氨基酸的“编码”与“扩增”,检测限低至飞摩尔每升,比质谱和ELISA灵敏10到10000倍。同时,研究者为之“量身定做“了蛋白质解析的计算机程序,以分析qPCR定量的氨基酸比例信号,完成对数据库中蛋白质的指认。研究者实验完成了ELA、URP和Aβ三条合成的分泌组多肽的鉴定,还借助计算机模拟证明了AmproCode能够成功鉴定超过90%的人类蛋白质,并评估了不同实验参数对AmproCode性能的影响,展示了此技术的应用潜力。

不同于近些年诸多将单分子技术应用到蛋白质测序领域的尝试,AmproCode是一种将蛋白质转化为可扩增分子的突破性技术。它为下一代蛋白质测序技术的开发提供了全新的思路。

 

研究详情请见原文:

Amplifiable protein identification via residue-resolved barcoding and composition code counting

https://doi.org/10.1093/nsr/nwae183


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