dp53m介导CRBN和p53-R175H突变体三元复合物的形成从而诱导蛋白靶向降解。 (IMAGE)

Science China Press

dp53m介导CRBN和p53-R175H突变体三元复合物的形成从而诱导蛋白靶向降解。

Caption

三元复合物形成及降解特异性分析。（a）分子动力学模拟分析p53m的结构及其与p53-R175H和CRBN的结合界面。（b）PAGE电泳确认p53m-DA与CRBNL连接成功。（c）微尺度热电泳法测定p53-WT和p53-R175H与dp53m的亲和力。（d）链霉亲和素下拉试验显示过量的dp53m竞争性结合p53-R175H。（e）荧光互补实验表明dp53m、CRBN与p53-R175H形成三元复合物。（f, g）AlphaLISA（f）及NanoBRET （g）实验表明dp53m可与CRBN和p53-R175H而不是p53-WT形成三元复合物。（h, i）H1299细胞免疫印迹（h）和定量分析（i）表达p53-R175H可被dp53m降解，而对p53-WT无影响。（j, k）免疫印迹（j）和定量分析（k）dp53m发挥作用的时间效应。（l）qPCR分析转染dp53m 24 h后H1299-R175H细胞中p53 mRNA水平。（m, n） PAGE电泳表明dp53m具有很好的血清稳定性。

Credit

©《中国科学》杂志社

Usage Restrictions

Use with credit.

License

Original content

Disclaimer: AAAS and EurekAlert! are not responsible for the accuracy of news releases posted to EurekAlert! by contributing institutions or for the use of any information through the EurekAlert system.