索烃化二氢叶酸还原酶的设计与生物合成 (IMAGE)

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索烃化二氢叶酸还原酶的设计与生物合成

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(a) l-DHFR（左）和cat-DHFR（中）的拓扑结构示意图及cat-DHFR的逆合成分析（右）；数字及字母分别指代从N段到C段的β折叠和α螺旋，索烃拆分位点（88位和89位氨基酸之间）位于α螺旋-C和β折叠-5之间；示意图中高亮的线段指代cat-DHFR中产生的新的柔性链；星形指代索烃的环I上可能的拆分位点，并在该位置融合分离型内含肽；L2指代索烃的环II中新生成的柔性链；(b) cat-DHFR的胞内合成过程示意图，DHFR1进行了环状重排，按照野生型DHFR从N端到C端的顺序将该部分命名为DHFR1-1和DHFR1-2；环I序列中插入TEV蛋白酶识别序列和寡聚甘氨酸柔性链，环II序列中插入组氨酸标签和一段柔性链（这两部分加在一起是L2）；(c) 使用服务器（https://robetta.bakerlab.org/）对l-DHFR进行结构预测；(d) 野生型DHFR的高斯连接数(GLN)矩阵，即所有残基与其相邻残基的高斯连接数，方框中的所有值之和即为索烃两条链间的高斯连接数，反映了两条链间的缠结程度。

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